Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 і TPS2

Кваско, АЮ
1Ісаєнков, СВ
Дмитрук, КВ
1Ємець, АІ
1ДУ "Інститут харчової біотехнології та геноміки НАН України", Київ
Dopov. Nac. akad. nauk Ukr. 2020, 6:92-100
https://doi.org/10.15407/dopovidi2020.06.092
Розділ: Біологія
Мова: Українська
Анотація: 

Введено в культуру in vitro рослини кількох сортів пшениці м’якої (Triticum aestivum L.) і досліджено їх регенераційну здатність. Відібрано сорти Миронівська 67 і Мірхад з метою перенесення в геном дріжджових (Saccharomyces cerevisiae) генів біосинтезу трегалози (TPS1 і TPS2) задля підвищення їх посухостійкості. Перенесення генів здійснювали за допомогою Agrobacterium-опосередкованої трансформації, для цього було створено відповідні векторні конструкції pBract214-TPS1 і pBract214-TPS2 із застосуванням технології Gateway-клонування. Як експланти для трансформації використовували незрілі зародки пшениці. В експериментах було використано штами A. tumefaciens GV3101, які несли окремо конструкції pBract214-TPS1 і pBract214-TPS2 з цільовими генами TPS1 та TPS2 відповідно, що знаходились під контролем промотору убіхітину кукурудзи PUbi, і селективним маркерним геном гігроміцин-фосфотрансферази (hpt). Селекцію трансгенних ліній здійснювали на поживних середовищах у присутності гігроміцину. Трансгенну природу отриманих ліній підтверджували за допомогою ПЛР-методу з використанням специфічних праймерів до генів TPS1 та TPS2.

Ключові слова: TPS2, Triticum aestivum, генетична трансформація, дріжджові гени TPS1, трегалоза